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 FICHE
TECHNIQUE
TEST D'ECOTOXICOLOGIE
AQUATIQUE
TEST DAPHNIES 24 HEURES
Ce test est réalisé selon la norme FN EN
1506341 (1996).
Évaluer la toxicité aiguë du produit testé pour la faune aquatique (micro-crustacés). Ce test permet de déterminer la concentration du produit testé qui, en 24 h,
immobilise 50 % des daphnies mises en expérimentation
(concentration efficace initiale inhibitrice, CE 50i - 24 h).
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Méthodologie
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Organisme test : daphnies
(Daphnia
magna).
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Conditions : contrôlées, à 200C
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Doses testées : concentrations variables (jusqu'à 90%) de lixiviat du
produit testé.
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Durée du test: 24 h.
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Paramètres mesurés : Immobilisations. La CE 50i - 24 h mesurée est déterminée par interpolation. La sensibilité du matériel biologique est contrôlée par un test au bichromate de potassium qui permet de calculer une valeur de CE 50i - 24 h corrigée tenant compte de
l'état physiologique de la population de daphnies.
TEST
ALGUES 72 HEURES
Ce test est effectué selon le protocole du projet de norme
AFN0R T90-360
Évaluer
la toxicité chronique du produit testé pour la flore aquatique. Ce test permet de déterminer la concentration du produit testé inhibant à 50 % la croissance d'une algue d'eau douce.
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Méthodologie
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Organisme test : algues d'eau douce
(Pseudokirchneriella subcapitata) en phase exponentielle de croissance.
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Conditions: contrôlées, en agitation à 230C sous lumière blanche
continue et en présence d'éléments nutritifs.
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Doses testées : concentrations variables de lixiviat du produit testé, déterminées par un essai préliminaire conduit en 48 ou 72 h.
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Durée du test : 72 h.
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Paramètres mesurés : Inhibition de la croissance. Le comptage des algues se fait à l'aide de cellules
d'hématimètres calibrées. La sensibilité de la souche algale est évaluée par des essais en présence de bichromate de potassium.
TEST DE GENOTOXICITE (
MUTATOX)
Détecter la présence d'agents mutagènes dans le produit testé. Ce test mesure la fréquence d'apparition d'une mutation portant sur la bioluminescence d'une bactérie marine.
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Méthodologie
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Organisme test : souche mutante « noire » d'une bactérie marine
(Vibrio fischert N 169).
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Conditions : contrôlées, avec et sans activateur des systèmes de détoxification (l'utilisation d'un activateur permet d'approcher la réalité d'un organisme entier possédant de tels systèmes).
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Doses testées : concentrations variables de lixiviat du produit testé.
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Durée du test :72h.
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Paramètres
mesurés : La lumière émise par la bactérie est
mesurée dans l'analyseur M 500 (modifié) après 16, 20 et 24 heures d'incubation.
Les agents mutagènes suspectés sont détectés
si l'intensité lumineuse est au moins deux fois supérieure a l'intensité lumineuse moyenne des témoins négatifs, et ce dans au moins deux concentrations successives différentes.
La qualité de la souche est contrôlée à l'aide de témoins positifs.
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Remarque importante :
La cytotoxicité d'un échantillon peut interférer avec les résultats de ce test, comme dans la plupart des tests de génotoxicité.
Il est alors utile de faire précéder ce test par une étude de la toxicité aiguë du produit (par exemple test Daphnies 24 h ou
Microtox) afin d'inclure dans le test de génotoxicité des concentrations pour lesquelles cet effet toxique ne s'exprime pas.
En effet, la génotoxicité s'exprime souvent à des concentrations inférieures à celles qui entraînent un effet toxique aigu.
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